一五五三年，愛德華死于結核病后，曾為華威伯爵，后來變成諾森伯蘭公爵的約翰·達德利（John Dudley）試圖策劃由珍·格雷繼位，結果篡位意圖未果。珍·格雷是亨利八世的甥孫女，是他最愛的妹妹瑪莉（Mary）所出的孫女；在他的遺愿中，若當時的愛德華王子、瑪麗公主和伊麗莎白公主皆亡，珍·格雷才可能出線繼位。諾森伯蘭公爵先是成功驅逐并替代索美塞得公爵，在愛德華六世繼位后成為攝政王；愛德華六世之死讓他積極想要維護政權，決心不讓熱愛天主教的瑪麗公主推翻愛德華六世在位期間建立的新教聲望。為達目的，他讓兒子吉爾福德（Guilford）迎娶了珍·格雷，同時煽動愛德華六世簽署一份非法文件，改變了繼位的順序。然而英國人民站在瑪麗公主這一邊，在民意浪潮的支持下，瑪麗公主繼位了。諾森伯蘭公爵犯了叛國罪，而被他利用的珍·格雷最后也被送上了斷頭臺。

諾森伯蘭公爵密謀篡位之事與伊麗莎白公主完全無關，她聰明地繼續(xù)待在國內。當姐姐瑪麗公主順利登基后，伊麗莎白公主也前往倫敦道賀。但這對同父異母的姐妹之間的關系，一直都不太輕松；隨后瑪麗女王開始懷疑，伊麗莎白公主的秘密身份為新教徒，這讓姐妹兩人的關系逐漸轉壞。一五五四年時，伊麗莎白公主被控與湯姆斯· 懷亞特爵士（Sir Thomas Wyatt）共同謀反，這場騷動從煽動民眾反對瑪麗女王計劃下嫁西班牙菲利普王子開始，導致伊麗莎白公主在倫敦塔中待了三個月，等待行刑之日。沒有任何證據(jù)能讓伊麗莎白公主定罪，盡管最后她被無罪釋放，但在姐姐瑪麗女王的心目中依然認定伊麗莎白公主有罪。伊麗莎白公主日后曾承認，淪落到倫敦塔中的日子，是年少記憶中最悲慘灰暗的一頁；在一次國會演說中，她回憶道：“我的人生陷入危機；我的姐姐如此怨恨我?！卑踩幻撾x苦牢后，她從未停止對神的感謝，她把自己成功獲救一事歸功為一場奇跡。事實上她應該感謝的是西班牙的菲利普王子，是他幫她向瑪麗女王求情，但伊麗莎白公主依然暗自向神祈禱，而且深信神聽見了她的祈求，也認可了她虔誠信仰的功效。直到一五七九年底，她依然不時私下祈禱感謝上蒼“把我拉出囹圄重回宮殿”。

在成功獲釋之后，伊麗莎白公主在國內低調行事，避免涉入任何反對姐姐的行動中，就在此時，瑪麗女王與菲利普二世的婚姻也觸了礁。

伊麗莎白公主于二十五歲時成功登基。她的身形又高又瘦，纖細的腰圍、小胸部和美麗纖長的手指卻讓她可以擺出各種華麗姿態(tài)。她繼承了母親橄欖色的黝黑皮膚，不過她有美白的習慣，她會涂抹一種由蛋白、蛋殼粉、罌粟籽、硼砂和明礬調制而成的乳液，讓皮膚白皙透亮。她那瘦長的臉型、高顴骨與尖下巴也遺傳自安·波林。她的父親則將紅卷發(fā)和高挺的鷹鉤鼻遺傳給她。一五五七年時，一名威尼斯使者曾經(jīng)寫道：“她的面貌姣好不顯英氣逼人，氣質出眾、眼睛迷人?！痹谀怯旨氂謴澋拿济拢兄浑p明亮又凌厲的眼睛，至于眼睛的顏色，眾人依然在爭議中。盡管她不算非常有魅力，但仍深深吸引許多男性的注意：不是所有臣子的阿諛都是為了奉承她而已。一名使者曾寫道，最重要的是，“她那不怒而威的氣質，比她的一舉一動更令人無法忽視，也不會有人不知道眼前的正是英國女王?！?/p>

一五五八年時，并沒有人真正了解她的個性。她從很小就學會自己需要他人忠告，必須控制自己的情緒，在大眾面前也得循規(guī)蹈矩，如此一來，在反對她的意見出現(xiàn)時才能自保。盡管她大多數(shù)的人生，都沒有活在公眾的眼光之下，她卻聰明地在毫不公然張揚的情況下，訴諸公眾的力量，她認同公眾的利益，她也成為宗教上的贏家，推崇新教。