分子生物學(xué)實驗技術(shù)

定　價：￥59.80

作　者：	呂立夏，王平，徐磊
出版社：	科學(xué)出版社
叢編項：
標(biāo)　簽：	暫缺

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ISBN：	9787030744739	出版時間：	2023-04-01	包裝：	平裝
開本：	16開	頁數(shù)：		字?jǐn)?shù)：

內(nèi)容簡介

　　分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展迅速，使得在分子水平解析生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)成為可能?！斗肿由飳W(xué)實驗技術(shù)》聚焦新近分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)展編寫而成?！斗肿由飳W(xué)實驗技術(shù)》包括七章：第一章CRISPR/Cas9技術(shù)，包括基因編輯的概述、小向?qū)NA（sg RNA）的克隆與鑒定；第二章基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析，包括啟動子分析、轉(zhuǎn)錄因子鑒定及表觀遺傳調(diào)控；第三章非編碼RNA分析，涉及非編碼RNA的生物信息分析及功能分析；第四章單細(xì)胞技術(shù)，簡述單細(xì)胞技術(shù)的原理及其應(yīng)用；第五章蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用分析，包括蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）數(shù)據(jù)庫和常用的檢測 PPI 的方法；第六章定點誘變與蛋白質(zhì)翻譯后修飾，重點介紹聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）介導(dǎo)的快速定點誘變、蛋白質(zhì)小分子泛素相關(guān)修飾物蛋白（SUMO）化位點鑒定以及蛋白質(zhì)泛素化的檢測方法；第七章基本生物信息在線工具的使用，包括基因表達(dá)總覽（Gene Expression Omnibus，GEO）、注釋、可視化和整合發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)庫（Database for Annotation，Visualization and Integrated Discovery，DAVID）、細(xì)胞景觀（cytoscape）、STRING和enrichr等。

作者簡介

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圖書目錄

第一章 CRISPR/Cas9技術(shù) 1
概述 1
實驗1-1 小向?qū)NA（sgRNA）設(shè)計與載體構(gòu)建 5
實驗1-2 重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化和單克隆篩選鑒定 14
實驗1-3 重組質(zhì)粒抽提和鑒定 17
實驗1-4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及陽性克隆鑒定 18
實驗1-5 基因編輯效率檢測 21
實驗1-6 逆轉(zhuǎn)錄定量PCR（RT-qPCR）檢測目標(biāo)基因表達(dá) 24
實驗1-7 蛋白質(zhì)印跡法（Western blotting）檢測目標(biāo)蛋白的表達(dá) 28
第二章基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析 31
概述 31
實驗2-1 雙螢光素酶報告基因檢測 36
實驗2-2 染色質(zhì)免疫沉淀PCR（ChIP-PCR） 40
實驗2-3 染色質(zhì)免疫沉淀測序（ChIP-seq） 43
實驗2-4 靶標(biāo)的切割和標(biāo)記（CUT&Tag）實驗 44
實驗2-5 甲醛輔助鑒定調(diào)控元件技術(shù) 47
實驗2-6 單細(xì)胞ATAC-seq 49
實驗2-7 重亞硫酸鹽全基因組甲基化測序 50
第三章非編碼RNA分析 53
概述 53
實驗3-1 長非編碼RNA（lncRNA）靶基因預(yù)測及功能分析 59
實驗3-2 利用在線工具對某一環(huán)狀RNA（circRNA）進(jìn)行初步分析 66
實驗3-3 circRNA的RT-qPCR檢測 71
實驗3-4 circRNA過表達(dá)及驗證 74
第四章單細(xì)胞技術(shù) 78
概述 78
實驗4-1 視網(wǎng)膜單細(xì)胞懸液制備 84
第五章蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用分析 87
概述 87
實驗5-1 酵母雙雜交 98
實驗5-2 拉下（pull-down）實驗 101
實驗5-3 免疫共沉淀 103
實驗5-4 熒光共振能量轉(zhuǎn)移 106
第六章定點誘變與蛋白質(zhì)翻譯后修飾 108
概述 108
實驗6-1 PCR 介導(dǎo)的快速定點誘變 113
實驗6-2 蛋白質(zhì)小分子泛素相關(guān)修飾物蛋白（SUMO）化位點鑒定 115
實驗6-3 蛋白質(zhì)泛素化檢測——變性免疫沉淀法 116
實驗6-4 蛋白質(zhì)泛素化檢測——鎳NTA 親和層析法 117
實驗6-5 蛋白質(zhì)泛素化檢測——體內(nèi)TUBEs 法119
實驗6-6 蛋白質(zhì)泛素化檢測——體外檢測法 120
第七章基本生物信息在線工具的使用 122
概述 122
實驗7-1 GEO 數(shù)據(jù)下載及差異基因分析 123
實驗7-2 利用在線工具對差異基因進(jìn)行聚類分析 131
實驗7-3 蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和hub基因篩選 132