生物化學與分子生物學實驗指導

目錄
**篇 生物化學與分子生物學實驗基本要求
**章 實驗室安全規(guī)則 1
**節(jié) 實驗規(guī)則 1
第二節(jié) 實驗室安全和注意事項 2
第三節(jié) 應急處理 2
第二章 實驗設計與實驗報告 4
**節(jié) 實驗設計 4
第二節(jié) 實驗記錄及實驗報告 5
第三節(jié) 實驗誤差 6
第四節(jié) 有效數(shù)字 8
第三章 實驗化學試劑 9
第四章 實驗室的基本操作 13
**節(jié) 玻璃器皿的洗滌 13
第二節(jié) 溶液的常規(guī)操作 16
第三節(jié) 實驗常用標本的制備 17
第四節(jié) 常用實驗器材的使用 20
第二篇 實驗室常用基本技術
第五章 離心技術 24
第六章 分光光度技術 28
第七章 層析技術 32
**節(jié) 吸附層析 32
第二節(jié) 分配層析 33
第三節(jié) 離子交換層析 33
第四節(jié) 凝膠過濾層析 34
第五節(jié) 親和層析 35
第八章 電泳技術 38
**節(jié) 概述 38
第二節(jié) 醋酸纖維素薄膜電泳 40
第三節(jié) SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 42
第四節(jié) 瓊脂糖凝膠電泳 44
第五節(jié) 其他電泳 46
第六節(jié) 電泳后大分子的檢測 47
第九章 聚合酶鏈式反應（PCR） 50
**節(jié) 一般聚合酶鏈式反應 50
第二節(jié) 反轉(zhuǎn)錄PCR 52
第三節(jié) 實時熒光定量PCR 53
第四節(jié) 原位PCR 55
第五節(jié) PCR擴增產(chǎn)物分析 56
第十章 生物大分子的制備 58
**節(jié) 生物大分子制備的前處理 58
第二節(jié) 生物大分子的提取 60
第三節(jié) 生物大分子的分離和純化 61
第四節(jié) 冷凍干燥 63
第十一章 AC9000型電解質(zhì)分析儀使用 66
第十二章 DS-3C微量元素檢測儀的使用 70
**節(jié) 概述 70
第二節(jié) DS-3C微量元素檢測儀的使用 70
第十三章 Bio-Rad分子成像系統(tǒng) 79
**節(jié) Image Lab操作手冊 79
第二節(jié) 免染總蛋白技術操作和分析指南 88
第三篇 生物化學與分子生物學實驗項目
第十四章 蛋白定量測定 91
**節(jié) 酚試劑法（改良Lowry） 91
第二節(jié) 紫外分光光度法 93
第三節(jié) 改良微量凱氏定氮法 94
第四節(jié) 考馬斯亮藍法 95
第五節(jié) 雙縮脲法 97
第十五章 蛋白醋酸纖維素薄膜電泳 99
第十六章 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)分子量 103
第十七章 凝膠層析法測定蛋白質(zhì)分子量 108
第十八章 乳酸脫氫酶同工酶測定 111
第十九章 影響酶促反應速率的因素 113
**節(jié) pH和溫度對酶促反應的影響 113
第二節(jié) 激活劑和抑制劑對酶促反應的影響 114
第二十章 堿性磷酸酶米氏常數(shù)的測定 117
第二十一章 血清/尿淀粉酶測定 121
**節(jié) 改良Winslow氏法 121
第二節(jié) 碘-淀粉比色法 122
第二十二章 血糖測定 124
**節(jié) 鄰甲苯胺法 124
第二節(jié) 葡萄糖氧化酶法 125
第三節(jié) 尿糖的定性測定（班氏試劑法） 127
第二十三章 血脂測定 129
**節(jié) 總膽固醇測定 129
第二節(jié) 甘油三酯測定 132
第三節(jié) 高密度脂蛋白測定（磷鎢酸-鎂沉淀法） 136
第四節(jié) 血清載脂蛋白的測定 137
第二十四章 超速離心法分離血漿脂蛋白 139
第二十五章 肝/尿中酮體的測定 141
**節(jié) 肝中酮體的測定 141
第二節(jié) 尿中酮體的定性測定（Lange法） 142
第二十六章 血清氨基轉(zhuǎn)移酶測定 145
**節(jié) 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶測定 145
第二節(jié) 血清谷草轉(zhuǎn)氨酶測定（賴氏法） 150
第二十七章 血清尿素氮測定 153
**節(jié) 二乙酰-肟法 153
第二節(jié) 脲酶-比色法 154
第三節(jié) 酶偶聯(lián)速率法測定血清尿素 155
第二十八章 血清膽紅素測定 157
**節(jié) 改良J-G法 157
第二節(jié) 膽紅素氧化酶法 159
第二十九章 提取基因組DNA（蛋白酶K消化法） 162
第三十章 提取人外周血基因組DNA 165
**節(jié) 改良碘化鉀法 165
第二節(jié) SDS裂解法 166
第三十一章 PCR擴增血液膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白D442G 168
第三十二章 DNA的瓊脂糖凝膠電泳 170
第三十三章 快速質(zhì)粒抽提及酶切鑒定 173
選擇題參考答案 176
參考文獻 178