基礎(chǔ)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

第一章 基因組DNA操作技術(shù)
第一節(jié) 基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)一 SDS法提取小麥葉片DNA
實(shí)驗(yàn)二 動物組織基因組DNA的提取
實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌基因組DNA的提取
第二節(jié) DNA質(zhì)量的檢測
實(shí)驗(yàn)四 核酸的酶切及電泳
第三節(jié) Southern雜交技術(shù)
實(shí)驗(yàn)五 小麥基因組DNA的Southern雜交

第二章 質(zhì)粒操作技術(shù) J7
第一節(jié) 外源基因插入質(zhì)粒及轉(zhuǎn)化大腸桿菌
實(shí)驗(yàn)一 外源基因與質(zhì)粒載體的連接
實(shí)驗(yàn)二 熱擊法轉(zhuǎn)化質(zhì)粒
第二節(jié) 質(zhì)粒的提取及檢測
實(shí)驗(yàn)三 堿裂解法提取大腸桿菌質(zhì)粒
實(shí)驗(yàn)四 質(zhì)粒的酶切鑒定

第三章 RNA操作技術(shù)
第一節(jié) 總RNA的提取及分析
實(shí)驗(yàn)一 用TRIZOL試劑提取小麥葉片總RNA
實(shí)驗(yàn)二 從冰凍血液中提取總RNA
實(shí)驗(yàn)三 總RNA的變性凝膠電泳
第二節(jié) Northem雜交技術(shù)
實(shí)驗(yàn)四 小麥衰老相關(guān)蛋白基因的Northern雜交
第三節(jié) cDNA文庫構(gòu)建及篩選
實(shí)驗(yàn)五 小麥cDNA文庫的構(gòu)建

第四章 PcR技術(shù)與應(yīng)用
第一節(jié) 普通PCR
實(shí)驗(yàn)一 PCR檢測重組質(zhì)粒中的插入片段
實(shí)驗(yàn)二 隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)DNA（RAPD）
附 用16S rDNA方法鑒定細(xì)菌種屬
第二節(jié) 反轉(zhuǎn)錄PCR
實(shí)驗(yàn)三 反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增小麥в-actin基因
第三節(jié) 定時(shí)熒光定量PCR
實(shí)驗(yàn)四 定時(shí)熒光定量PCR測定小麥中Cu/Zn-SOD基因含量

第五章 電子克隆
實(shí)驗(yàn)一 基于生物信息學(xué)克隆水稻過氧化氫酶基因

第六章 蛋白質(zhì)分離與檢測技術(shù)
第一節(jié) SDS-PAGE電泳分離蛋白質(zhì)
實(shí)驗(yàn)一 SDS-PAGE電泳檢測蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
附 1，5-二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶的層析分離與電泳鑒定
第二節(jié) Western雜交技術(shù)
實(shí)驗(yàn)二 小麥RuBisCO蛋白的Western雜交
第三節(jié) 等電聚焦電泳
實(shí)驗(yàn)三 小麥過氧化物酶同工酶的等電聚焦分析
第四節(jié) 蛋白質(zhì)雙向電泳
實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)雙向電泳檢測小麥葉片蛋白

第七章 外源基因的表達(dá)
第一節(jié) 外源基因在大腸桿菌中的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)一 綠色熒光蛋白基因表達(dá)載體的構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)二 綠色熒光蛋白在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)
第二節(jié) 外源基因在枯草桿菌中的表達(dá)
實(shí)驗(yàn)三 枯草桿菌電擊轉(zhuǎn)化（高滲透法）
實(shí)驗(yàn)四 重組載體pHT43-lip在枯草桿菌中的分泌表達(dá)
第三節(jié) 外源基因在酵母中的分泌表達(dá)
實(shí)驗(yàn)五 綠色熒光蛋白重組表達(dá)載體pPIC9K-GFP的構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)六 綠色熒光蛋白在畢赤酵母中的誘導(dǎo)表達(dá)

主要參考文獻(xiàn)
附錄
附錄一 常用試劑及緩沖液
附錄二 氨基酸及遺傳密碼
附錄三 常用的相對分子質(zhì)量標(biāo)記
附錄四 分子生物學(xué)有關(guān)網(wǎng)絡(luò)資源
附錄五 分子實(shí)驗(yàn)常用儀器設(shè)備