生物化學與分子生物學實驗技術(shù)

第一部 分生物化學與分子生物學實驗基本知識1
第一節(jié) 生物化學與分子生物學實驗室規(guī)則1
第二節(jié) 生物化學實驗的基本操作3
第二部 分生物化學與分子生物學實驗原理與技術(shù)7
第一節(jié) 分光光度法7
第二節(jié) 離心技術(shù)15
第三節(jié) 層析技術(shù)27
第四節(jié) 電泳41
第五節(jié) 分子克隆49
第六節(jié) 聚合酶鏈式反應(PCR)54
第七節(jié) 核酸分子雜交技術(shù)62
第三部 分生物化學與分子生物學實驗71
第一節(jié) 生物化學基本實驗71
實驗1 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)濃度71
實驗2 Folin酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質(zhì)濃度74
實驗3 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質(zhì)含量76
實驗4 紫外分光光度法測定蛋白質(zhì)79
實驗5 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳81
實驗6 預染血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳86
實驗7 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清乳酸脫氫酶同工酶88
實驗8 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDSPAGE)92
實驗9 等電聚焦電泳法測定蛋白質(zhì)的等電點97
實驗10 影響酶活性的因素100
實驗11 蔗糖酶的專一性103
實驗12 底物濃度對酶促反應速度的影響——過氧化氫酶Km的測定105
實驗13 抑制劑對酶促反應速度的影響109
實驗14 血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性測定(賴氏法)111
實驗15 血清甘油三酯含量的測定——乙酰丙酮法114
實驗16 血漿高密度脂蛋白（HDL）膽固醇含量的測定116
實驗17 酮體的生成118
實驗18 運動對全血乳酸含量的影響120
第二節(jié) 生物化學綜合實驗122
實驗19 激素對血糖濃度的影響122
實驗20 血清γ球蛋白的分離與純度鑒定126
實驗21 血清清蛋白的分離及電泳鑒定130
實驗22 核酸的分離提取、成分鑒定及含量測定133
第三節(jié) 分子生物學實驗148
實驗23 大腸桿菌感受態(tài)細胞制備及外源DNA的轉(zhuǎn)化148
實驗24 質(zhì)粒DNA的提取152
實驗25 質(zhì)粒DNA的限制性內(nèi)切酶酶切154
實驗26 DNA的瓊脂糖凝膠電泳157
實驗27 PCR基因擴增159
實驗28 Southern雜交分析162
實驗29 Northern雜交分析166
附錄169
附錄Ⅰ 化學試劑分級及注意事項169
附錄Ⅱ 常用緩沖液配制方法170
附錄Ⅲ 重鉻酸洗液的配制與再生173
參考文獻175