基因工程原理

1　基因工程概述
　1.1　基因工程概念
　　1.1.1　基因工程的基本定義
　　1.1.2　基因工程的基本原理和流程
　1.2　基因工程發(fā)展簡史
　　1.2.1　早期準備
　　1.2.2　基因工程的誕生
　　1.2.3　基因工程的成熟
　　1.2.4　進入第二代基因工程
　1.3　基因工程技術(shù)研究的主要內(nèi)容
　　1.3.1　基因工程的基礎(chǔ)性研究
　　1.3.2　基因工程的應(yīng)用性研究
2　基因操作中的工具酶
　2.1　限制性內(nèi)切酶
　　2.1.1　限制性內(nèi)切酶的識別序列
　　2.1.2　限制性內(nèi)切酶的命名
　　2.1.3　限制性內(nèi)切酶的酶切片斷　
　　2.1.4　限制性內(nèi)切酶的類型
　　2.1.5　限制性內(nèi)切酶的反應(yīng)系統(tǒng)
　2.2　DNA聚合酶
　　2.2.1　大腸桿菌DNA聚合酶工
　　2.2.2　DNA聚合酶工的大片段(Klenow片段)
　　2.2.3　T4噬菌體DNA聚合酶
　　2.2.4　T7噬菌體DNA聚合酶
　　2.2.5　熱穩(wěn)定的DNA聚合酶
　　2.2.6　逆轉(zhuǎn)錄酶
　　2.2.7　末端轉(zhuǎn)移酶
　2.3　DNA連接酶
　　2.3.1　T4 DNA連接酶
　　2.3.2　大腸桿菌的DNA連接酶
　2.4　RNA聚合酶
　2.5　其他工具酶類
　　2.5.1　堿性磷酸酶
　　2.5.2　T4多核苷酸激酶
　　2.5.3　核酸酶
3　基因工程載體
　3.1　載體的基本要求和特性
　　3.1.1　載體的基本要求
　　3.1.2　載體具有與使用目的相一致的結(jié)構(gòu)
　3.2　質(zhì)粒載體
　　3.2.1　質(zhì)粒載體的生物學(xué)特性
　　3.2.2　質(zhì)粒載體構(gòu)建的思路
　　3.2.3　pBR322質(zhì)粒載體
　　3.2.4　pUC質(zhì)粒載體
　　3.2.5　pGEM系列載體質(zhì)粒
　　3.2.6　pBluescriptII KS
3.3　天噬菌體載體
　　3.3.1　入噬菌體的生物學(xué)特性
　　3.3.2　入噬菌體構(gòu)建載體的依據(jù)
　　3.3.3　構(gòu)建入噬菌體載體的基本策略
　　3.3.4　入噬菌體載體的舉例
　　3.3.5　入噬菌體載體的應(yīng)用
3.4　M13噬菌體載體
　　3.4.1　M13噬菌體與載體有關(guān)生物學(xué)特性
　　3.4.2　構(gòu)建Ml3載體
　　3.4.3　噬菌粒載體
　　3.4.4　M13載體的應(yīng)用
　3.5　cosmid載體
　　3.5.1　cosmid載體的概況
　　3.5.2　cosmid載體的特性
　　3.5.3　cosmid載體使用的基本程序
　3.6　酵母人工染色體
　3.7　細菌人工染色體
　3.8　哺乳動物細胞的載體
　　3.8.1　SV40載體
　　3.8.2　腺病毒載體
　　3.8.3　痘苗病毒
　　3.8.4　逆轉(zhuǎn)錄病毒載體
4　核酸的分離純化和制備
　4.1　質(zhì)粒DNA的制備
　　4.1.1　質(zhì)粒DNA提取方法的選擇
　　4.1.2　質(zhì)粒提取的共同步驟
　……
5　DNA克隆
6　DNA序列測定
7　DNA文庫
8　克隆篩選與檢測
9　外源目的蛋白質(zhì)表達及其篩選
10　蛋白質(zhì)工程原理
11　基因工程藥物
主要參考書目