目錄
第一章 植物病理學研究的計劃
第二章 植物病害文獻
第一節(jié) 文獻收集提綱
第二節(jié) 文獻來源
第三節(jié) 文獻的記載
第三章 植物病害的調查
第一節(jié) 調查的類別
1.一般調查
2.重點調查
3.調查研究
第二節(jié) 發(fā)病程度
1.記載方法
(1)直接計數(shù)法
(2)分級計數(shù)法
[1] 分級用文字敘述
[2]分級用圖或照相表示
[3]分級標準制作法
2.感染指數(shù)
3.取樣方法
(1)樣本數(shù)目
(2)取樣地點
(3)樣本類別
(4)樣本要小而可靠
(5)取樣時間
第三節(jié) 病害損失的估計
1.估計的方法
2.典型病害損失的估計
(1)麥類銹病
(2)黑穗病
(3)馬鈴薯晚疫病
(4)棉花黃萎病
(5)大麥云紋病
(6)小麥全蝕病
(7)甜菜黃化病毒病
(8)小麥條紋花葉病
(9)根結線蟲
第四章 植物病害和菌類標本的采集
和制作
第一節(jié) 標本的采集
第二節(jié) 標本的制作
1.標本干燥制作法
2.浸漬標本制作法
(1)防腐浸漬液
(2)防腐漂白浸漬液
(3)保存綠色的浸漬液
[1]醋酸銅浸漬液
[2]硫酸銅亞硫酸浸漬液
[3]瓦查(Vacha)浸漬液
(4)保存黃色和桔紅色標本的浸漬液
(5)保存紅色的浸漬液
[1]赫斯婁浸漬液
[2]波爾浸漬液
[3]瓦查保存紅色浸漬液
(6)保存真菌色素的浸漬液
[1]硫酸鋅福爾馬林浸漬液
[2]醋酸汞冰醋酸浸漬液
[3]醋酸鉛浸漬液
(7)浸漬標本的保存
[1]臨時封口法
[2]永久封口法
3.真菌菌種干燥保存法
第三節(jié) 標本的整理、排列和保藏
1.玻面紙盒保藏
2.蠟葉標本紙上保藏
3.封套內保藏
第五章 實驗室的一般操作
第一節(jié) 實驗室的管理
1.整潔問題
2.儀器使用和維護
3.安全問題
(1)基本設備
(2)毒品的管理和使用
(3)同位素使用
(4)其他輻射線
第二節(jié) 玻璃器皿的洗滌
1.洗滌劑
(1)水
(2)鉻酸洗滌液
(3)高錳酸鉀
(4)酸和堿
(5)有機溶劑
(6)肥皂和其他洗滌劑
2.各種玻璃器皿的洗滌
(1)新的器皿
(2)一般器皿
(3)載玻片和蓋玻片
(4)發(fā)酵管等小器皿
(5)滴定管和吸管
(6)特殊清潔法
3.玻璃器皿的干燥
第三節(jié) 分析天平的使用
1.分析天平的結構與砝碼
2.使用注意事項
3.天平的休止點和靈敏度
(1)休止點
(2)靈敏度
第四節(jié) 溶液的配制
1.濃度表示的方法
(1)百分數(shù)濃度
[1]重量計算
[2]容量計算
(2)摩爾濃度
(3)元素含量計算
2.各種溶液的配制法
(1)鹽的水溶液
(2)堿的水溶液
(3)酸的水溶液
第六章 培養(yǎng)基
第一節(jié) 微生物的營養(yǎng)
1.碳素來源
2.氮素來源
3.礦物質營養(yǎng)
4.生長物質
第二節(jié) 培養(yǎng)基的成分和種類
1.天然培養(yǎng)基
2.半組合培養(yǎng)基
3.組合培養(yǎng)基
第三節(jié) 培養(yǎng)基的理化性狀
1.固體和液體培養(yǎng)基
(1)瓊膠
(2)明膠
(3)硅膠
2.培養(yǎng)基濃度和成分比例
3.培養(yǎng)基的酸度和緩沖容
(1)各種微生物對酸度的適應范圍
(2)培養(yǎng)基酸度的調節(jié)方法
(3)緩沖容的影響和調節(jié)
4.培養(yǎng)基的氧化還原條件
第四節(jié) 常用培養(yǎng)基的配制
1.馬鈴薯葡萄糖瓊膠培養(yǎng)基
2.肉汁凍培養(yǎng)基
(1)蛋白胨
(2)牛肉浸膏
(3)酵母膏
3.燕麥片瓊膠培養(yǎng)基
4.玉米粉瓊膠培養(yǎng)基
5.麥芽膏瓊膠培養(yǎng)基
6.植物組織和煎汁
7.玉米粉砂土培養(yǎng)基
8.查彼(Czapek)培養(yǎng)液
9.土壤浸漬液瓊膠培養(yǎng)基
第五節(jié) 培養(yǎng)基的保藏
第六節(jié) 滅菌對培養(yǎng)基的影響
1.酸度的變化
2.碳水化合物的水解
3.葡萄糖發(fā)生的反應
4.沉淀物的產生
第七節(jié) 選擇性培養(yǎng)基
1.一般選擇性培養(yǎng)基
2.特殊選擇性培養(yǎng)基
第七章 滅菌
第一節(jié) 滅菌的原理和方法
1.熱力滅菌
(1)干熱滅菌
(2)濕熱滅菌
[1]加壓蒸汽滅菌
[2]流動蒸汽滅菌
2.過濾滅菌
(1)原理和方法
(2)幾種細菌濾器的性能和使用
[1]賽次濾器
[2]燒結玻璃濾器
[3]薄膜濾器
(3)濾器的洗滌
3.輻射滅菌
(1)電離輻射
(2)紫外線輻射
第二節(jié) 各種材料的滅菌處理
1.玻璃器皿的滅菌
2.培養(yǎng)基的滅菌
3.土壤的滅菌
4.刀、剪、鋏等的滅菌
第八章 植物病原物的接種
第一節(jié) 接種試驗的意義
第一節(jié) 接種方法
1.種子傳染病害的接種
(1)拌種法
(2)浸種法
2.土壤傳染病害的接種
(1)土壤接種法
(2)蘸根接種法
(3)根部切傷接種法
3.氣流和雨水傳播病害的接種
(1)噴霧法
(2)噴撒法
(3)涂抹法
(4)注射法
(5)針刺法
4.昆蟲傳染病害的接種
第三節(jié) 影響接種試驗的因子
1.病原物的致病性和致病力
2.植物的感病性和抗病性
3.環(huán)境條件的影響
第四節(jié) 侵染現(xiàn)象的觀察和研究
1.侵入前階段
2.侵入期的觀察
(1)氣孔侵入的觀察
[1]氣孔形狀和大小的觀察
[2]病菌從氣孔侵入的觀察
(2)其他自然孔口侵入的觀察
(3)傷口侵入的觀察
(4)直接穿透侵入的觀察
3.潛育期和發(fā)病期的觀察和研究
(1)破壞性的肉眼觀察
[1]酶的作用
[2]毒素的作用
(2)植物顯微化學測定
[1]淀粉的碘液測定
[2]纖維素的測定
[3]粘膠類物質的測定
[4]木質素的測定
[5]木栓質細胞壁的染色
[6]角質層的染色
[7]幾丁質的染色
[8]氧化酶的測定
[9]過氧化氫酶的測定
[10]細胞的酸度
(3)熒光檢查
(4)生理和生化變化的測定
第五節(jié) 接種試驗的記載
第九章 顯微鏡的使用和保養(yǎng)
第一節(jié) 光學顯微鏡
1.光學的基本知識
(1)光的振幅
(2)光的波長和頻率
(3)光波的相
(4)光子
2.各種光學顯微鏡
(1)明視野顯微鏡
[1]光學系統(tǒng)各部分的性能
[2]放大倍數(shù)、焦距和工作距離
[3]明視野顯微鏡使用方法
(2)暗視野顯微鏡
[1]反光鏡側面照射
[2]星形虹彩光圈
[3]暗視野聚光鏡
(3)相差顯微鏡
[1]工作原理
[2]使用方法
(4)干涉顯微鏡
(5)熒光顯微鏡
[1]熒光現(xiàn)象
[2]熒光顯微鏡的構造
[3]使用方法
3.光學顯微鏡的保養(yǎng)
第二節(jié) 電子顯微鏡
1.透射電子顯微鏡
2.掃描電子顯微鏡
第十章 切片機切片和染色方法
第一節(jié) 輪轉切片機切片——石蠟
切片法
1.固定
(1)固定的藥品
[1]酒精
[2]福爾馬林
[3]醋酸
[4]鉻酸
[5]鋨酸
[6]升汞
[7]苦味酸
(2)固定液
[1]福爾馬林醋酸酒精固定液(FAA)
[2]鉻酸醋酸福爾馬林固定液(Nawaschin)
[3]鉻酸醋酸鋨酸固定液(Flemming)
[4]鉻酸醋酸固定液
[5]氧化二乙烯固定液(Newcomber)
(3)固定方法
2.脫水
(1)丁醇
[1]叔丁醇
[2]正丁醇
(2)氧化二乙烯
(3)酒精
(4)苯
(5)丙酮
3.石蠟滲透
4.包埋
5.切片
(1)固著
(2)切片刀的角度
(3)切片刀的保養(yǎng)
(4)切片的厚薄
6.粘貼
7.去蠟
8.染色
(1)染料的性狀
(2)常用染料的性能
[1]蘇木精
[2]酸性品紅
[3]堿性品紅
[4]藏紅O
[5]結晶紫和龍膽紫
[6]曙紅Y
[7]赤蘚紅
[8]蘇丹Ⅲ和蘇丹Ⅳ
[9]橙G
[10]苯胺藍
[11]卡紅
[12]亞甲藍
[13]中性紅
[14]淺綠SF
[15]堅牢綠FCF
(3)染色方法的三個典型
[1]單染——鐵礬蘇木精染色法
[2]復染——藏紅O堅牢綠染色法
[3]三重染——弗蘭敏三重染色法
(4)植物組織中細菌和真菌的染色
[1]苯酚品紅染色法
[2]蘇木精曙紅Y染色法
[3]硫堇藍橙G染色法
[4]結晶紫染色法
9.透明
10.封固
第二節(jié) 滑行切片機切片——木材切片
1.切片
2.染色
(1)蘇木精藏紅O染色法
(2)藏紅O苯胺藍染色法
(3)藏紅O淺綠染色法
(4)硝酸銀染色法
第十一章 植物真菌病害
第一節(jié) 真菌的分類和命名
第二節(jié) 癥狀的觀察和描述
1.癥狀的觀察和描述
2.顯微鏡檢查
(1)菌絲體和子實體的挑取檢視
[1]水作浮載劑
[2]乳酚油
[3]甘油乳酸液
[4]水合氯醛碘液
[5]甘油
[6]甘油明膠
[7]氧化二乙烯
(2)葉面真菌的粘貼檢視
[1]透明膠帶粘貼
[2]醋酸纖維素粘貼
[3]火棉膠和其他粘貼劑
(3)組織整體透明檢視
[1]水合氯醛透明
[2]甘油乳酸液水合氯醛透明
[3]乳酸透明
[4]吡啶透明
(4)真菌的玻片培養(yǎng)檢視
(5)瓊膠培養(yǎng)基中真菌的檢視
(6)組織浸離檢視
(7)真菌細胞核和染色體的觀察
[1]真菌細胞核的觀察
[2]真菌染色體的觀察
(8)徒手切片檢視
3.顯微鏡計測和顯微描繪
(1)顯微計測的方法
[1]接目測微尺計測法
[2]顯微繪圖儀計測法
[3]螺旋測微計
[4]放映計測法
(2)真菌孢子的計測問題
[1]浮載劑的影響
[2]孢子大小的記載法
(3)顯微描繪
第三節(jié) 真菌的分離和培養(yǎng)
1.真菌的分離
(1)分離的準備工作
(2)分離材料的選擇
(3)組織的表面消毒
[1]升汞溶液
[2]漂白粉
[3]次氯酸鈉
[4]酒精和其他表面消毒劑
(4)一般分離方法
[1]組織分離法
[2]稀釋分離法
[3]細菌污染的排除
(5)各種類型病害病原真菌的分離法
[1]斑點病病原真菌的分離
[2]維管束組織內病原真菌的分離
[3]根腐病菌的分離
[4]肉質組織中病菌的分離
[5]種子內病菌的分離法
[6]孢子分離法
(6)特殊類型真菌的分離
[1]粘菌的分離
[2]壺菌的分離
[3]水霉菌的分離
[4]內生菌的分離
[5]銹菌的分離
[6]黑粉菌的分離
[7]高等擔子菌的分離
(7)土壤中真菌的檢測和分離
[1]稀釋平板法
[2]土壤平板分離法
[3]土壤中菌絲體的分離法
(8)土壤中植物病原真菌的分離
[1]腐霉屬和疫霉屬真菌的分離
[2]鐮孢屬真菌的分離
[3]輪枝孢霉屬真菌的分離
[4]絲核菌的分離
[5]土壤中輪枝菌(Verticillium)的
定量
[6]小菌核屬真菌的分離
2.菌種的純化和單孢子的分離
(1)瓊膠平板稀釋純化法
(2)稀釋純化法
(3)瓊膠平板表面單孢子挑取法
(4)玻璃毛細管分離法
(5)干孢子分離法
(6)顯微操作器分離法
3.真菌的培養(yǎng)和生長量的測定
(1)培養(yǎng)性狀的觀察
(2)生長量的測定
[1]目力估測
[2]直線生長
[3]濕重測定
[4]干重測定
(3)真菌的移植
4.真菌菌種保存
(1)室溫保存
(2)低溫保存
(3)礦物油下保存
(4)土壤中保存
(5)干燥保存
(6)冷凍干燥保存
(7)滅菌蒸餾水中保存
(8)防止螨類的侵害
第四節(jié) 真菌孢子的產生、萌發(fā)和
計數(shù)
1.真菌孢子產生的條件
2.促使真菌孢子產生的途徑
(1)培養(yǎng)基的種類和成分
[1]減低養(yǎng)分的濃度
[2]改變碳源、氮源和它們的比例
[3]選用不同的培養(yǎng)基
[4]微量元素和維生素等
(2)培養(yǎng)基的理化性狀
[1]固體和液體培養(yǎng)基
[2]氫離子濃度
[3]滅菌方法
(3)培養(yǎng)條件
[1]溫度
[2]光照
(4)培養(yǎng)方法
[1]通氣和振蕩
[2]移植方法
[3]培養(yǎng)時期
[4]劃碎菌落
3.孢子萌發(fā)的條件
(1)溫度
(2)濕度
(3)空氣
(4)氫離子濃度
(5)養(yǎng)分和其他刺激萌發(fā)的物質
(6)光照
(7)孢子的壽命和生活力
(8)孢子的成熟度和休眠期
4.孢子萌發(fā)的方法
(1)懸滴法
(2)載玻片上的萌發(fā)法
(3)培養(yǎng)皿中萌發(fā)法
(4)瓊膠平板表面萌發(fā)法
(5)其他方法
5.孢子萌發(fā)的記載
6.真菌孢子的計數(shù)
(1)計數(shù)器計數(shù)法
(2)培養(yǎng)皿計數(shù)法
(3)混濁度計數(shù)法
第十二章 植物細菌病害
第一節(jié) 植物病原細菌的分類和
命名
1.棒桿菌屬 (Corynebacterium)
2棒形桿菌屬(Clavibacter)
3.短小桿菌屬 (Curtobacterium)
4.木質部小菌屬(Xylella)
5.嗜木質菌屬(Xylophilus)
6土壤桿菌屬 (Agrobacterium)
7.歐文氏菌屬 (Erwinia)
8假單胞菌屬(Pseudomonas)
9.黃單胞菌屬(Xanthomonas)
第二節(jié) 植物病原細菌的鑒定
1.細菌病害標本的檢查
(1)癥狀的觀察
(2)顯微鏡檢查
2.植物病原細菌常見的屬和種
第三節(jié) 病原細菌的分離和培養(yǎng)
1.分離方法
(1)培養(yǎng)皿稀釋分離法
(2)平板劃線分離法
[1]分離材料新鮮
[2]適宜的培養(yǎng)基
[3]菌落的選擇和分離
2.分離培養(yǎng)基
(1)通用培養(yǎng)基
[1]肉汁凍培養(yǎng)基
[2]馬鈴薯葡萄糖(或蔗糖)培養(yǎng)基
(2)屬和種的選擇性培養(yǎng)基
[1]土壤桿菌屬(Agrobacterium)
[2]假單胞菌屬(Pseudomonas)
[3]黃單胞菌屬(Xanthomonas)
[4]歐文氏菌屬(Erwinia)
[5]棒形桿菌屬(Clavibacter)
(3)選擇性培養(yǎng)基
[1]選擇碳源
[2]選擇氮源
[3]抑制性物質
3.培養(yǎng)性狀
(1)培養(yǎng)性狀的描述
[1]培養(yǎng)液培養(yǎng)性狀
[2]瓊膠斜面培養(yǎng)性狀
[3]瓊膠平板培養(yǎng)性狀
(2)細菌的色素
4.植物病原細菌的保存
(1)在植物組織中保存
(2)斜面保存
[1]保存黃單胞菌屬細菌的培養(yǎng)基
[2]保存假單胞菌屬細菌的培養(yǎng)基
(3)滅菌蒸餾水中保存
(4)礦物油下保存
(5)甘油保存
(6)冷凍干燥
(7)干燥保存
(8)明膠膜干燥保存
5.細菌的計數(shù)
(1)測數(shù)計計數(shù)法
(2)混濁度計數(shù)法
(3)平板菌落計數(shù)法
(4)其他方法
第四節(jié) 致病性的測定
1.過敏性反應——致病性的初步測定
2.常規(guī)接種測定
(1)接種物的準備
(2)接種方法
[1]葉斑病和葉枯病的接種
[2]腫瘤和莖桿枝條病害的接種
[3]腐爛病的接種
[4]蔫萎病的接種
第五節(jié) 細菌的形態(tài)
1.細菌運動的觀察
(1)懸滴法
(2)培養(yǎng)法
2.細菌的大小和形狀
3.革蘭氏染色法
4.鞭毛染色
(1)載玻片的準備
(2)細菌懸浮液的配制
(3)涂片
(4)染色
[1]賴夫生(Leifson)染色法
[2]西薩-基爾(Cerares-Gill)染色法
[3]柯達卡(Kodaka)溶液染色法
5.莢膜染色
(1)繪圖墨汁顯示法
(2)硫酸銅染色法
6.芽孢染色
7.抗酸性染色
8.類脂內含物染色
9.異染粒染色
10.細胞壁染色
11.晶體染色
第六節(jié) 生理和生物化學性狀
1.溫度的關系
2.細菌的耐干能力
3.細菌的耐鹽性
4.好氧性和厭氧性
5.碳素化合物的利用和分解
(1)發(fā)酵試驗
(2)檸檬酸鹽和丙二酸鹽的利用
[1]檸檬酸鹽的利用
[2]丙二酸鹽的利用
(3)甲基紅試驗
(4)七葉靈水解
6.氮素化合物的利用和分解
(1)硝酸鹽和亞硝酸鹽的還原
[1]格里斯(Griess-11Osvary)試劑測
定法
[2]特羅姆斯陀夫(Trommsdorf)試劑
測定法
(2)蛋白胨的分解
[1]氨的產生
[2]硫化氫的產生
[3]吲哚的產生
7.大分子化合物的分解
(1)明膠液化
(2)淀粉水解
(3)脂肪的分解
8.其他反應測定
(1)石蕊牛乳
(2)氧化酶
(3)過氧化氫酶
9.冰核反應
第七節(jié) 植物病原細菌的血清學
1.抗血清的制備
(1)抗原和抗體
(2)抗血清的制備過程
[1]動物的準備
[2]免疫注射
[3]抗血清的處理
2.血清學反應
(1)凝集反應
[1]原理
[2]凝集反應的測定方法
(2)凝集素吸附反應
(3)補體固定反應
(4)沉淀反應
(5)瓊膠擴散法
(6)酶聯(lián)法
(7)熒光抗體
[1]原理
[2]細菌熒光抗體技術
[3]使用熒光抗體須注意的問題
(8)免疫分離法
第八節(jié) 細菌的噬菌體
1. 噬菌體的分離、純化、繁殖和保存
(1)噬菌體的分離
(2)噬菌體的純化
(3)噬菌體的繁殖
[1]瓊膠平板法
[2]培養(yǎng)液繁殖法
(4)噬菌體的保存
2.噬菌體的定量
(1)一般瓊膠平板法
(2)表層平板法
(3)雙層瓊膠法
3.噬菌體性狀的觀察和測定
(1)噬菌斑的大小和形態(tài)
(2)寄主范圍的測定
(3)失毒溫度的測定
(4)血清學反應
(5)噬菌體的吸附現(xiàn)象和它的利用
[1]測定未被吸附的噬菌體
[2]測定受侵染細菌的數(shù)目
(6)噬菌體的潛育期和繁殖量
[1]離心除去游離噬菌體
[2]抗血清除去游離噬菌體
4.噬菌體的應用
(1)植物病原細菌菌系的鑒別
(2)利用噬菌體的消長預測病菌的消失和
發(fā)病情況
(3)利用噬菌體測定寄主細菌的存在
(4)病害防治上的應用
第九節(jié) 植物細菌病害的防治
第十三章 植物植原體和螺原體病害
第一節(jié) 植物植原體和螺原體的
分類地位
第二節(jié) 植物植原體病害
1.植物植原體病害的重要性
2.植物植原體病害的診斷
(1)癥狀診斷
[1]病毒病還是植原體病
[2]蟲毒
[3]生理性病害和藥害
(2)四環(huán)素等抗菌素類的治療
(3)植物植原體的顯微鏡檢查
[1]熒光顯微鏡檢查
[2]電子顯微鏡檢查
(4)接種試驗
(5)植物植原體的保存
3.植物植原體的提純
4.抗血清的制備和血清學反應
5.植物植原體的核酸探針
第三節(jié) 植物螺原體病害
1.螺原體種的劃分
2.螺原體的顯微鏡檢查
3.螺原體的分離和培養(yǎng)
(1)螺原體的分離
[1]植物組織內分離
[2]昆蟲體內分離
(2)培養(yǎng)基
4.抗血清的制備和血清學反應
5.傳染試驗
6.螺原體病害的防治
第十四章 放線菌
第一節(jié) 放線菌的分離和培養(yǎng)
1.分離
(1)土壤分離
[1]甘油精氨酸培養(yǎng)基
[2]淀粉酪朊培養(yǎng)基
[3]大豆粉葡萄糖培養(yǎng)基
(2)植物病組織中分離
2.純化和培養(yǎng)
3.菌種的保存
第二節(jié) 瓊膠平板上拮抗作用的測定
1.純化菌種的測定
(1)拮抗體和測定生物瓊膠平板表面接種
(2)拮抗體接種混有測定生物的瓊膠平板
2.土壤中拮抗體直接篩選
(1)平板稀釋法
(2)三層瓊膠法
(3)噴霧法
第三節(jié) 培養(yǎng)濾液效價的測定
1.抑制生長濃度測定法
(1)液體培養(yǎng)測定
(2)瓊膠平板培養(yǎng)測定
2.環(huán)柱測定法
3.紙碟測定法
第四節(jié) 放線菌的形態(tài)觀察
第十五章 植物病毒病害
第一節(jié) 植物病毒的本質
第二節(jié) 植物病毒的分類和命名
1.Bromovirus Group(雀麥花葉病毒組)
2.Carmovirus Group(香石竹斑駁病毒組)
3.Comovirus Group(豇豆花葉病毒組)
4.Cucumovirus Group(黃瓜花葉病毒組)
5.Fabavirus Group(蠶豆病毒組)
6.Luteovirus Group(黃化病毒組)
7.Satellitevirus Group(衛(wèi)星病毒組)
8.Tobamovirus Group(煙草花葉病毒
組)
9.Rhabdovirus Group(桿狀病毒組)
10.Cryptovirus Group(隱癥病毒組)
11.Reovirus Group(呼腸孤病毒組)
12.Geminivirus Group(雙體病毒組)
13.Caulimovirus Group(花椰菜花葉病毒組)
第三節(jié) 植物病毒病的癥狀
1.植物病毒病的外部癥狀
(1)花葉
(2)變色
(3)環(huán)斑和環(huán)紋
(2)鏡頭的直徑
(3)光圈
2.濾色片
3.標本的攝影
4.顯微攝影
第五節(jié) 報告
1.準備提綱
(1)題目
(2)前言
(3)試驗材料和方法
(4)觀察 調查 試驗結果
(5)討論
(6)參考文獻
2.準備圖表
3.報告寫作
附錄 常用化學藥品譯名對照表