細(xì)胞生物學(xué)實驗

     目 錄
   第一章 顯微鏡技術(shù)
    一 光學(xué)顯微鏡
    （一）光學(xué)原理（二）基本結(jié)構(gòu)（三）顯微鏡的性能（四）照
    明方法（五）顯微鏡的使用（六）顯微測量（附：掃描分光光度
    計及圖像分析儀在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用）（七）顯微攝影
    （附：彩色顯微攝影）（八）顯微錄像
    二 各類光學(xué)顯微鏡
    （一）暗視野顯微鏡（二）相差顯微鏡（三）熒光顯微鏡
    （四）偏光顯微鏡（五）干涉顯微鏡（六）體視顯微鏡
    （七）倒置顯微鏡 （八）共聚焦顯微鏡
    三 電子顯微鏡
    （一）透射電子顯微鏡（二）超高壓電子顯微鏡（三）掃描
    電子顯微鏡（四）電視電子顯微鏡（五）透射掃描電子顯微
    鏡（六）掃描隧道電子顯微鏡
    四 質(zhì)子顯微鏡
    實驗一 光學(xué)顯微鏡下的細(xì)胞和細(xì)胞器及其顯微測量
    實驗二 暗視野和相差顯微鏡的使用及其對胞質(zhì)環(huán)流的
    觀察
    實驗三 植物細(xì)胞骨架的光學(xué)顯微鏡觀察
    實驗四 植物細(xì)胞有絲分裂各期染色體形態(tài)分析及顯微攝影
    （附：一種新的植物染色體染色方法）
    實驗五 植物姊妹染色單體區(qū)分染色法
    實驗六 X、Y染色質(zhì)檢查（附：X－染色質(zhì)的硫堇顯色）
    實驗七 骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備
    實驗八 人類染色體高分辨顯帶
    實驗九 植物染色體高分辨率顯帶技術(shù)
    實驗十 染色體核仁組成區(qū)的銀染
    實驗十一 人體姊妹染色單體區(qū)分染色
    實驗十二 用測微熒光法定量細(xì)胞DNA
    實驗十三 用圖像分析儀測定細(xì)胞幾何參數(shù)
   第二章 細(xì)胞組織化學(xué)技術(shù)
    一 顯微標(biāo)本的制作
    （一）光學(xué)顯微鏡切片制作技術(shù)（二）電子顯微鏡切片
    制作技術(shù)（三）冰凍切片技術(shù)
    二 顯微標(biāo)本的染色
    （一）活體染色（二）固定染色（三）超薄切片的染色
    實驗十四 DNA的細(xì)胞化學(xué)——Feulgen法
    實驗十五 RNA的細(xì)胞化學(xué)——Brachet染色法
    實驗十六 線粒體的固定和染色
    實驗十七 高爾基體的固定和染色
    實驗十八 堿性磷酸酶的定位
    實驗十九 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的酸性磷酸酶顯示
   第三章 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
    一 動物細(xì)胞培養(yǎng)
    （一）體外培養(yǎng)細(xì)胞的性質(zhì)（二）培養(yǎng)條件（三）培養(yǎng)方法
    （四）凍存方法（五）單細(xì)胞的獲得及細(xì)胞計數(shù)（六）常規(guī)準(zhǔn)
    備工作
    二 動物細(xì)胞融合技術(shù)
    （一）融合的細(xì)胞（二）融合劑（三）雜種細(xì)胞的選擇
    （四）雜交瘤與單克隆抗體
    三 染色體分析技術(shù)
    （一）標(biāo)本制備（二）植物細(xì)胞染色體制片（三）分帶技術(shù)
    （四）組型分析
    四 植物細(xì)胞培養(yǎng)
    （一）激素條件（二）原生質(zhì)體培養(yǎng)（三）原生質(zhì)體融合
    （四）植物細(xì)胞固定化生產(chǎn)技術(shù)
    實驗二十 哺乳類動物離體貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
    實驗二十一 細(xì)胞的原代培養(yǎng)
    實驗二十二 細(xì)胞的凍存與解凍
    實驗二十三 細(xì)胞培養(yǎng)物中支原體污染的檢測
    實驗二十四 貼壁細(xì)胞集落形成率的測定
    實驗二十五 細(xì)胞轉(zhuǎn)化
    實驗二十六 細(xì)胞骨架的免疫熒光方法顯示
    實驗二十七 胡蘿卜韌皮部愈傷組織誘發(fā)培養(yǎng)
    實驗二十八 胡蘿卜細(xì)胞懸液的制備及懸浮培養(yǎng)
    實驗二十九 平板法培養(yǎng)胡蘿卜單細(xì)胞
    實驗三十 植物細(xì)胞原生質(zhì)體的制備與培養(yǎng)
    實驗三十一 植物體細(xì)胞雜交
   第四章 細(xì)胞組分分離技術(shù)
    一 離心的原理和方法
    （一）差速離心（二）密度梯度離心
    二 離心機的使用（附：Hitachi高速冷凍離心機的使用）
    實驗三十二 密度梯度離心法提取葉綠體
    實驗三十三 差速離心法提取線粒體及線粒體的
    活體染色
    實驗三十四 細(xì)胞組分的分離（附：更精致的分離方案）
   第五章 同位素技術(shù)
    一 放射自顯影的基本原理
    （一）常用的放射性同位素（二）乳膠（三）自顯影的
    有效率與分辨率
    二 放射自顯影的基本操作
    （一）顯微放射自顯影方法（二）電子顯微鏡放射自顯影方法
    三 放射性同位素的衛(wèi)生防護
    四 液體閃爍測量技術(shù)
    （一）液體閃爍樣品制備（二）樣品的測量（三）測量中的
    猝滅及其校正
    實驗三十五 細(xì)胞放射目顯影
    實驗三十六 染色體半保留復(fù)制的放射自顯影測定
    實驗三十七 用液體閃爍計數(shù)法快速測定細(xì)胞非預(yù)定期
    DNA合成
   第六章 細(xì)胞工程技術(shù)
    一 細(xì)胞拆合技術(shù)
    （一）物理拆合法（二）化學(xué)拆合法
    二 染色體導(dǎo)入技術(shù)
    （一）小細(xì)胞介導(dǎo)的染色體轉(zhuǎn)移（二）人體中期染色體分離技術(shù)
    三 基因轉(zhuǎn)移技術(shù)
    （一）細(xì)胞融合法（二）染色體介導(dǎo)法（三）紅細(xì)胞血影
    轉(zhuǎn)移法（四）脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)移法（五）DNA介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移
    （六）微注射技術(shù)（附：培養(yǎng)細(xì)胞的顯微注射）（七）細(xì)胞器
    介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移
    四 胚胎培養(yǎng)及其相關(guān)技術(shù)
    （一）胚胎培養(yǎng)（二）胚胎移植（三）無性繁殖
    （四）嵌合體技術(shù)
    實驗三十八 單克隆抗體的產(chǎn)生：雜交瘤融合
    實驗三十九 培養(yǎng)細(xì)胞NIH3T3的顯微注射
   第七章 其他技術(shù)
    一 細(xì)胞動力學(xué)技術(shù)
    （一）細(xì)胞分裂同步化（二）細(xì)胞周期時相分析（三）誘導(dǎo)
    早熟染色體凝集
    二 同工酶技術(shù)
    三 相關(guān)免疫學(xué)技術(shù)
    （一）細(xì)胞免疫體外試驗（二）免疫熒光技術(shù)（三）免疫酶
    技術(shù)（四）放射免疫分析（五）免疫電泳技術(shù)
    四 原位雜交技術(shù)
    五 暗室技術(shù)
    （一）暗室攝影（二）底片沖洗（三）印相技術(shù)（附：制作
    調(diào)藍(lán)幻燈片）（四）擴印
    實驗四十 細(xì)胞膜的滲透性
    實驗四十一 細(xì)胞的凝集反應(yīng)
    實驗四十二 染色體早熟凝集實驗
    實驗四十三 植物細(xì)胞材料的同工酶技術(shù)
    實驗四十四 原位雜交法定位基因在染色體上的位置
   附錄
    一 一般光學(xué)顯微鏡鏡頭標(biāo)志
    二 常用生物固定液
    三 常用生物染色劑
    四 常用緩沖液
    五 細(xì)胞培養(yǎng)用液
    （一）動物細(xì)胞培養(yǎng)液
    （二）植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)液
    六 封片劑與粘貼劑
    （一）封片劑
    （二）粘貼劑
    七 洗液的配制
    八 顯影液、定影液的配制
   主要參考文獻與書目